大便隱血試驗可通過化學法、免疫法、轉鐵蛋白檢測等方法進行，檢測過程需注意采樣規范性和飲食限制。
采用愈創木酯或聯苯胺試劑，利用血紅蛋白中的過氧化物酶活性產生顏色反應。采樣前3天需禁食紅肉、動物內臟及富含維生素C的食物，避免假陽性或假陰性結果。樣本應選取糞便表面及內部不同部位的3-5處黏液或可疑部分。
使用抗人血紅蛋白單克隆抗體，特異性識別人類血紅蛋白。該方法不受飲食影響，但需注意樣本需在1小時內送檢或使用專用保存管。采樣時應避開尿液污染，月經期女性需延期檢測。
同步檢測轉鐵蛋白可提高消化道出血檢出率，尤其適用于上消化道出血。需采集新鮮糞便5-10g裝入無菌容器，冷藏保存不超過24小時。檢測前需停用阿司匹林等抗凝藥物7天。
使用專用采樣棒從糞便不同部位取材，避免接觸便池水。腹瀉患者需采集水樣便中的固體成分，便秘者可取樣表面黏液。采樣后立即密封送檢，高溫環境需冰袋保存。
陽性結果需結合臨床表現判斷，可能提示痔瘡、消化道潰瘍或腫瘤。連續3次檢測可提高準確性，強陽性者建議進行結腸鏡檢查。檢測前應詳細詢問用藥史及飲食情況。
進行大便隱血試驗期間建議保持清淡飲食，多攝入白肉、豆制品和煮熟的蔬菜，避免劇烈運動導致生理性出血。檢測后可根據結果選擇胃腸鏡檢查或定期復查，長期服用抗凝藥物者需咨詢醫生調整方案。日常注意觀察大便性狀變化，發現持續異常及時就醫。
