復方環磷酰胺片在體外無抗腫瘤活性,進入體內后先在肝臟中經微粒體功能氧化酶轉化成醛磷酰胺,而醛磷酰胺不穩定,在腫瘤細胞內分解成磷酰胺氮芥及丙烯醛,磷酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。那如何進行復方環磷酰胺片含量測定?
取本品20片,除去糖衣,精密稱定,研細,精密稱出適量(約相當于環磷酰胺0.3g)置100ml量瓶中,加乙醇適量,充分振搖使環磷酰溶解,加乙醇至刻度,搖勻,用干燥濾紙濾過,精密量取續濾液50ml,加5%氫氧化鈉溶液40ml,加熱回流2小時,放冷至室溫,加硝酸溶液(1→2)10ml使酸化,精密加硝酸銀滴定液(0.1mol/L)15ml,搖勻,加硝基苯5ml,強力振搖,再加硫酸鐵銨指示液2ml,用硫氰酸銨(0.1mol/L)滴定,并將滴定的結果用空白試驗校正,即得(每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當于13.96mg的C7H15N2O2Cl2P?/FONT>H2O)。
人參莖、葉總皂苷對照品溶液的制備精密稱量60℃減壓干燥3小時的人參皂苷Re對照品適量,置量瓶中,加甲醇溶解,制成每1ml中約含2mg的溶液作為對照品溶液。
測定法:取本品20片,除去包衣,干燥,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于人參莖、葉總皂苷40mg),置25ml量瓶中,加甲醇適量,振搖20分鐘,再加甲醇至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液與對照品溶液各50μl,分別加入10ml具塞量筒或試管(預先置冰浴內)中,精密加入新配制的1%香草醛高氯酸溶液0.5ml,混勻,于60℃水浴中加熱15分鐘,取出并立即放入10℃以下水中,冷卻1分鐘,精密加入硫酸溶液(23ml水加入77ml硫酸)5ml,搖勻,放置,待氣泡消失后,慢慢傾入比色杯中,以試劑同樣操作為空白計算,于540nm的波長處測定吸收度,按兩者吸收度的比值計算,結果乘以0.84,即得。